透过率
透过样品的辐射功率与入射到样品上的辐射功率之比。
当样品表现出“吸收”时,仪器首先观察到的其实是透射光相对于参考光发生了变化。透过率就是这两次光功率测量之间最直接的比值。
透过率 T 定义为透过样品后的辐射功率 P 与入射或参考辐射功率 P₀ 之比。T = 1 表示两者相等,T 变小表示到达探测器的光减少;吸光度通过 A = −log₁₀(T) 与它连接。
实验显示的百分透过率只是 T 乘以 100%。由于吸光度采用对数尺度,同样的透过率绝对变化在不同信号区间不会对应相同的吸光度变化,尤其在低透过率端更应谨慎。
T = P/P₀;A = −log₁₀(T)
透过率是比值,没有单位;百分透过率为 100T%。光减少不一定只来自吸收
总透过结果可能同时包含吸收、界面反射和散射的影响。澄清溶液中的分子吸收较接近理想模型,而浑浊细胞悬液、颗粒样品或带气泡的液柱会把部分光偏转出探测路径。此时透过率仍然降低,却不能把全部变化都解释为目标分子的吸收。
Blank 用于建立参考条件,必须尽量匹配溶剂、缓冲液、容器或测量表面。若 Blank 与样品之间的基质、液面或清洁状态不同,这些差异会直接进入 P/P₀。
低透过率端为什么更难测
高吸收样品只留下很弱的目标透射光,光源波动、探测器噪声和杂散光在总信号中的相对占比都会增大。仪器即使仍显示一个数值,也不代表这个数值仍满足方法所需的准确度和线性。
处理低透过率样品时,稀释或缩短光程通常比盲目延长积分更有意义。还应检查全谱是否出现平台化、样品是否散射,以及测量区间是否经过参考材料或方法验证。
透过率告诉我们光学系统收到了什么,吸光度则是对这一比值的数学表达;两者都必须结合样品状态和测量条件解释。