光度线性
仪器光度响应在规定范围内遵循预期比例关系的程度。
当样品按比例稀释,测得吸光度也应在适用范围内按比例变化。偏离这种关系时,同一个换算公式会在不同浓度区间给出不同程度的误差。
线性关注响应的形状
光度线性描述系统对一系列已知透过率或吸光度水平的响应,能否保持规定的函数关系。它需要多个水平、明确拟合模型和残差评价,而不是只比较一个测量点。
光度准确度关注结果与参考值的接近程度;线性关注响应随信号变化是否保持比例。多个点可以落在一条直线上,却整条线都存在偏置,因此线性好不等于准确度高。
高吸收区域为何容易弯曲
随着吸光度升高,目标透射光迅速变弱。杂散光形成相对固定的额外信号,使表观透过率不再按预期下降,常表现为吸光度增长变慢;探测器、放大电路和模数转换的非线性也会改变曲线。
短光程可把样品移到较低吸光度区,但有效光程本身必须可靠。若不同光程分别使用,不能只把所有结果拼成一条线而忽略各光程的校准与切换条件。
稀释线性不是万能证明
真实样品稀释会同时改变盐浓度、溶剂比例、化学平衡和散射,因而既考察仪器,也考察样品与操作。使用可溯源参考材料更适合评价光度标尺,真实样品系列则用于验证具体方法。
评价应查看残差分布、范围端点和重复测量,而不仅是相关系数。很高的相关系数可能掩盖端点偏差,也不能推导出方法在范围外仍然线性。
光度线性需要说明“在什么范围、以什么材料、按什么误差标准成立”,而不是给一条没有条件的直线。