Beer–Lambert 定律是什么？

Beer–Lambert 定律在规定条件下把吸光度写成 A=εcl，其中 ε 是吸收物种在特定波长和介质条件下的摩尔吸光系数，c 是浓度，l 是吸收光程。它表达的是在其他条件保持一致时，吸光度与浓度和光程之间的比例关系，而不是对所有样品自动成立的通用换算。

公式中的每个量都带有实验条件。ε 会随波长、物种形态和周围介质改变，有效光程必须在测量过程中可知且稳定，样品还应足够均匀，并尽量避免明显散射或化学反应。光谱带宽如果覆盖了吸收曲线变化很快的区域，仪器记录的平均信号也可能偏离理想单色光条件。

实际定量时，实验人员通常不会只凭一次读数认定线性成立，而会使用标准曲线或稀释系列检查测量区间。若浓度降低一半后，扣除稀释因素的结果仍明显变化，或残差呈现系统趋势，就应怀疑样品、参考、光程或仪器条件已经超出方法的适用范围。

常见失效原因包括高浓度下的分子相互作用、酸碱或结合平衡改变、颗粒散射、杂散光、有限带宽和光度非线性。稀释后恢复线性可以帮助定位问题，但也要确认稀释没有改变物种状态。Beer–Lambert 定律说明的是受控条件下的关系，不能替代对样品组成和方法有效性的验证。