什么是吸光度?

吸光度把透过率转换为对数量,定义为 A=-log₁₀(T)。透过样品的光越少,计算得到的吸光度通常越高。由于采用对数转换,吸光度每增加相同数值,对应的是透过率按相同比例继续降低,而不是透射光强做等量减少。

这种表达方式的价值在于,在 Beer–Lambert 关系适用时,吸光度可以与吸收物种浓度和有效光程建立线性关系。核酸测量中,实验人员常在规定波长读取吸光度,再根据已确认的方法系数和光程估算浓度;但计算成立的前提是样品、Blank、波长和换算模型都与该方法一致。

如果不同稀释倍数换算回原样后不能得到相近结果,或吸光度随浓度不再近似成比例,就不应继续把单个读数直接解释为浓度。此时需要检查样品是否过浓、是否存在散射或气泡、Blank 是否匹配、有效光程是否稳定,以及仪器在该信号范围内是否满足方法要求。

吸光度不是样品脱离条件后的绝对标签,也不能单独证明样品身份、纯度或活性。波长、温度、pH、容器、有效光程、杂散光和基线都会进入最终结果。负吸光度或很高的吸光度首先是需要追查参考与测量条件的信号,不能仅靠把数值截断或重新命名来解决。

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