为什么蛋白比色法必须做标准曲线?
标准曲线建立的是本次反应条件下显色信号与浓度的关系。标准与样品应使用一致的加样、试剂、孵育时间和温度条件,并尽量匹配基质。
判断曲线时不仅看拟合系数,还要检查空白、重复测量、各浓度点偏离及样品是否落在有效范围内。超范围样品应按方法要求稀释后重新反应,不宜直接外推。
曲线平滑不保证样品没有干扰。标准蛋白与待测蛋白响应不同、样品含还原剂或去污剂等情况,都可能产生系统偏差,需查对应试剂的兼容条件。
标准曲线建立的是本次反应条件下显色信号与浓度的关系。标准与样品应使用一致的加样、试剂、孵育时间和温度条件,并尽量匹配基质。
判断曲线时不仅看拟合系数,还要检查空白、重复测量、各浓度点偏离及样品是否落在有效范围内。超范围样品应按方法要求稀释后重新反应,不宜直接外推。
曲线平滑不保证样品没有干扰。标准蛋白与待测蛋白响应不同、样品含还原剂或去污剂等情况,都可能产生系统偏差,需查对应试剂的兼容条件。